pH傳感器多為組合式pH探頭,由一個玻璃電極和參比電極組成,通過一個位于小的多孔塞上的液體結合點與培養(yǎng)基連接,多孔塞位于傳感器的側面。
pH探頭是一種產生電壓信號的電化學元件,其內阻相當高,因此產生的電位只能由一種高輸入阻抗的直流放大器來測量,這種放大器可以獲取微量電流。許多pH計及控制器都含有合適的放大器。
實踐中應用可滅菌的由玻璃電極和參比電極組成的pH探頭,該電極的基礎部分是極薄的玻璃膜,它可與水反應,形成50-500nm的水合成凝膠層。這一凝膠層存在于膜的兩側,是正確保養(yǎng)電極的關鍵部位。凝膠層中的H+是流動的,膜兩側離子活度之差會形成pH相關電位。
電極末端的球形元件采用能對pH產生響應的玻璃制成,可將響應限定在電極頂端小面積的玻璃膜內。通過在電極的球內填充緩沖液來維持玻璃膜內表面的電位恒定,該緩沖液經過測定,并具有穩(wěn)定的組分和恒定而的H+活度。液體中的pH變化會導致膜外表面的電位發(fā)生變化,因此檢測時需要一個參比電極來共同構成檢測回路。在這種組合電極中,參比電極是構成電極的主要部分,由含有飽和AgCl的KCl電解液中的Ag/AgCl電極組成,這種參比電極一定要與過程流體直接接觸,因為它需要連續(xù)電流,這可以通過將Cl—電解液與過程流體相連的橫隔膜來實現,從而使微量但連續(xù)的電解液透過膜而向外流動,并能保持連續(xù),同時防止污染電極。
pH傳感器的使用:1、校準2、滅菌3、校準的檢查發(fā)酵過程中溶氧的檢查和溶氧電極
溶氧濃度的檢測方法主要有三種,zui常用的溶氧檢測方法是使用可蒸汽滅菌的電化學檢測,用膜將電化學電池與發(fā)酵液隔開。對溶氧的測定,重要的一點是膜僅對O2有滲透性,而其它可能干擾檢測的化學成分不能通過。
O2通過滲透膜對發(fā)酵液擴散到檢測器的電化學電池,O2在陰極被還原時會產生可檢測的電流或電壓,這與氧氣到達陰極的速率成比例。需要指出,陰極檢測到的實際是O2到達陰極的速率,這取決于它到膜外表面的速率、跨膜傳遞的速率以及它從內膜表面?zhèn)鬟f到陰極的速率。如果忽略傳感器內所有的動態(tài)效應,氧氣到達陰極的速率與氧氣跨膜擴散的速率成正比,而且與氧從發(fā)酵液擴散到膜表面的速率相等,膜表面的擴散速率與氧傳質的總濃度驅動力成正比。假定膜內表面的氧濃度可以有效的降為零,則擴散速率僅與液體中的溶氧濃度,從而使電極測得的信號與液體中溶氧濃度成正比。
實際發(fā)酵過程中,有必要對電極進行校準。電極檢測的實際是傳質速率,因而需要在發(fā)酵過程中相同的流體力學條件下進行校準,而且溶氧電極應能耐受滅菌。很明顯,在發(fā)酵開始前在發(fā)酵罐中進行校準。